基因操作

基因干擾

　　RNA干擾(RNA interference，RNAi)是正常生物體內(nèi)抑制特定基因表達(dá)的一種現(xiàn)象，當(dāng)細(xì)胞中導(dǎo)入與內(nèi)源性mRNA編碼區(qū)同源的雙鏈RNA(double stranded RNA，dsRNA)時(shí)，該mRNA發(fā)生降解而導(dǎo)致基因表達(dá)沉默的現(xiàn)象。外源dsRNA 進(jìn)入細(xì)胞后產(chǎn)生的小分子干擾RNA（small interfering RNA, siRNA）的反義鏈和多種核酸酶形成了沉默復(fù)合物(RNA-induced silencing complex，RISC)，RISC具有結(jié)合和切割mRNA的作用而介導(dǎo)RNA干擾的過程。

載體選擇（部分）

病毒載體的選擇，根據(jù)實(shí)驗(yàn)的需求參考慢病毒、腺相關(guān)病毒、腺病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒等。

載體類別	編號(hào)	載體元件
慢病毒干擾	GL401	pCLenti-U6-shRNA-CMV-Puro-WPRE
	GL404	pCLenti-U6-shRNA-CMV-EGFP-WPRE
	GL407	pCLenti-U6-shRNA-CMV-EGFP-F2A-Puro-WPRE
	GL408	GL408 pCLenti-U6-shRNA-CMV-mCherry-F2A-Puro-WPRE
	H7615	pCLenti-U6-shRNA-CMV-mCherry-F2A-BSR-WPRE
腺病毒干擾	DKD001	pADV-U6-shRNA-CMV-EGFP
腺病毒干擾	DKD004	pADV-U6-shRNA-CMV-mCherry
腺相關(guān)病毒干擾	AKD001	pAAV-CBG-EGFP-3xFLAG-WPRE-H1-shRNA
	AKD003	pAAV-CBG-mCherry-3xFLAG-WPRE-H1-shRNA
	H12663	pAAV-U6-shRNA/spgRNA v2.0-CMV-EGFP-WPRE