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九游會j9生物一直致力為神經(jīng)科學研究、腫瘤研究、代謝研究等領域提供科研服務整體解決方案，包括質(zhì)粒構(gòu)建、病毒包裝、穩(wěn)定株構(gòu)建、細胞功能學實驗、動物疾病模型構(gòu)建、外泌體研究等整體服務。
腫瘤整體課題（嚴謹真實、結(jié)果可靠）
1. 高通量基因篩。河酶咄坎廡、基因芯片和 CRISPR/Cas9 文庫進行關鍵基因篩選。
真核轉(zhuǎn)錄組測序、外顯子組測序、基因表達譜芯片、miRNA 測序/芯片
m6A 甲基化測序、lncRNA 測序/芯片、單細胞轉(zhuǎn)錄組測序、iTRAQ 蛋白質(zhì)組定量
Nat Commun. 2016 Apr 6;7:11215.
2. 基因調(diào)控：用病毒或質(zhì)粒載體介導基因過表達、敲除或干擾，可以實現(xiàn)對基因表達的上調(diào)或下調(diào)。
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過表達質(zhì)粒、干擾質(zhì)粒、CRISPR/Cas9 質(zhì)粒
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腺相關病毒（AAV）、慢病毒（LV）、腺病毒（ADV）、逆轉(zhuǎn)錄病毒（RV）
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3. 細胞水平驗證：在細胞水平驗證基因的功能，包括細胞增殖、細胞遷移與侵襲、細胞凋亡、細胞周期等。
J Hepatol. 2018 Jun;68(6):1214-1227.
4. 動物體內(nèi)實驗：通過構(gòu)建動物模型檢測基因水平變化后引起的指標變化，包括皮下成瘤、原位成瘤、腫瘤大小、腫瘤轉(zhuǎn)移等。
J Hepatol. 2018 Jun;68(6):1214-1227.
5. 作用機制研究：進一步挖掘出與關鍵基因相關的信號通路或其它基因，包括雙螢光素酶檢測、RNA pull-down、BioID、CO-IP 等。
J Hepatol. 2018 Jun;68(6):1214-1227.
神經(jīng)整體課題（團隊專業(yè)、服務完善）
1. 疾病模型構(gòu)建：專業(yè)提供慢性痛、腦卒中、抑郁、神經(jīng)退行性疾病、癲癇等神經(jīng)系統(tǒng)動物疾病模型的構(gòu)建。
Cichon J et al.,Bio Protoc.2018；Proc Natl Acad Sci U S A. 2017 Jul 11;114(28):E5673-E5682.
2. 環(huán)路示蹤：借助病毒載體的示蹤技術，可實現(xiàn)對全腦、核團、環(huán)路、細胞、單細胞及亞細胞器的標記，從復雜的神經(jīng)環(huán)路到高分辨率的單神經(jīng)元形態(tài)，建立完善的示蹤體系。
Cell Stem Cell. 2020 Mar 5;26(3):331-345.e6.
3. 元件操控：通過病毒載體和腦定位注射技術可完成基因過表達、基因沉默、光遺傳學、化學遺傳學的精準特異性操控。
Science. 2018 Oct 26;362(6413):429-434.
4. 表型篩選及變化：從分子到細胞再到行為的一站式服務，包括 WB、qPCR、電生理、病理、免疫組化、行為學實驗。
m6A 甲基化課題（思路設計、服務完善）
1. 預實驗：找到與 RNA 甲基化相關的酶是否有差異表達或檢測整體 m6A 水平，用 qPCR、WB、組織芯片、質(zhì)譜檢測等，再進行甲基化酶敲低、敲除和過表達細胞實驗和動物實驗。
Song H et al. Autophagy. 2019；Chen M. et al. (2018) Hepatology, 67(6): 2254
2. 通過 m6A-seq 測序，可以知道哪些基因在 RNA 甲基化修飾上有差異,再結(jié)合轉(zhuǎn)錄組測序，發(fā)現(xiàn)差異基因的表達水平變化。
Chen M. et al. (2018) Hepatology, 67(6): 2254
3. 獲得 RNA 甲基化修飾的目的基因后，再對 m6A 甲基化進行修復，觀察位點修復正常后對細胞表型和小鼠腫瘤及腫瘤大小的影響。
Huang H et al. Nat Cell Biol. 2018
4. 進一步挖掘甲基化酶通過哪些通路對目的基因進行調(diào)控或蛋白互作技術挖掘蛋白，包括蛋白與 DNA 或 RNA 互作、蛋白與蛋白互作、靶基因驗證等。
Chen M. et al. (2018) Hepatology, 67(6): 2254
外泌體研究課題（經(jīng)驗豐富、質(zhì)量可靠）
1. 外泌體分離：差速超速離心法可以獲得高質(zhì)量、高純度的外泌體，因此被認為是分離方法中的「金標準」，也是高分文章中常用的分離方法。
2. 外泌體鑒定：常用的鑒定方法包括透射電鏡（TEM）、納米粒徑跟蹤分析（NTA）、Western Blot（WB）標志物檢測等。
ACS Nano. 2019 Feb 26;13(2):2450-2462.
3. 高通量分析：外泌體內(nèi)含有與細胞來源相關的核酸和蛋白質(zhì)，可以傳遞 mRNA、miRNA、lncRNA、circRNA、蛋白質(zhì)等進入受體細胞，參與細胞間通訊。
Cell Commun Signal. 2019 Aug 16;17(1):96.
4. 外泌體示蹤：常用親脂性染料對外泌體進行標記，主要包括兩類，一是 PKH67（綠色）和 PKH26（紅色），二是 DiO（綠色）、DiI（橙色）和 DiR（深紅）。
Oncol Rep. 2012 Nov;28(5):1551-8；BMC Cancer. 2019 Oct 29;19(1):1015.
5. 體內(nèi)外功能研究：將標記的外泌體與受體細胞共培養(yǎng)，觀察細胞功能變化，再將外泌體注射入動物模型中，觀察腫瘤大小、轉(zhuǎn)移，并檢測相關指標。
Nat Commun. 2018 Jan 15;9(1):191.
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