近日，貴州中澤微環(huán)生物科技有限公司（下稱“中澤微環(huán)”）與九游會j9生物技術(shù)（上海）股份有限公司（下稱“九游會j9生物 ”）合作的、基于微環(huán)DNA（minicircle DNA）的雙抗基因藥ZM001正式完成中美IND申報的CMC材料工作，不久將啟動IND申報，有望快速進入臨床試驗階段。該藥物結(jié)合基因療法與雙特異性抗體（雙抗）技術(shù)，成功實現(xiàn)體內(nèi)雙抗持久、穩(wěn)定、高效表達，是治療B淋巴細(xì)胞血液惡性腫瘤的潛在顛覆性新型療法。

近年來，隨著人們對基因功能的理解不斷深入和腫瘤免疫療法的發(fā)展，多種高效、低毒的免疫治療產(chǎn)品接踵面世，為癌癥的治愈帶來了希望。目前主流的新興免疫療法主要包括免疫檢查點抑制劑、重定向免疫效應(yīng)細(xì)胞的雙抗以及嵌合抗原受體T細(xì)胞（CAR-T）療法，其中雙抗療法因擁有兩個特異性抗原結(jié)合位點（或一個抗原的兩個不同表位），可以同時作用于靶細(xì)胞和功能細(xì)胞（一般為T細(xì)胞），進而增強對靶細(xì)胞的“殺傷力”，而備受矚目。

目前應(yīng)用最成功的、針對腫瘤治療的雙抗藥物是2014年美國FDA批準(zhǔn)上市的藥物Blinatumomab（Amgen公司），該雙抗藥物是抗CD19 及抗 CD3單鏈抗體可變區(qū)（scFv）組成的BiTE模式（Bispecific T-cell engager）雙抗藥物，適應(yīng)癥為復(fù)發(fā)或難治的前體B細(xì)胞急性淋巴細(xì)胞白血。≒recursor B-cell lymphoblastic leukemia）。 

 

然而，由于Blinatumomab體內(nèi)半衰期只有2個小時左右，治療期間病人需要植入微泵定時輸注，且該雙抗的治療費用不菲（兩個療程約20萬美元），給患者造成了巨大心理和經(jīng)濟負(fù)擔(dān)。而如果采用基因治療的手段，將攜帶雙抗蛋白基因的載體遞送至體內(nèi)，通過體內(nèi)雙抗蛋白基因表達來高效、持續(xù)表達雙抗蛋白，則有望發(fā)展成為更好的雙抗療法替代方案。 

常規(guī)基因療法的基因載體包括病毒載體、非病毒載體（如質(zhì)粒載體、微環(huán)DNA載體）。其中，微環(huán)DNA載體是一種來源于質(zhì)粒DNA的新型超螺旋表達元件，是包含基因表達盒子的最小環(huán)狀DNA，由陳志英教授與斯坦福大學(xué)同事發(fā)明。由于微環(huán)載體缺乏原核DNA骨架序列（如抗性基因、原核復(fù)制起始點等），且剔除導(dǎo)致基因表達沉默效應(yīng)的骨架DNA，其可提高治療基因表達水平、基因治療的安全性及降低免疫原性等，被越來越多地應(yīng)用。微環(huán)DNA成藥的關(guān)鍵技術(shù)還有體內(nèi)靶向的遞送，已由陳志英教授帶領(lǐng)原中科院深圳先進技術(shù)研究院團隊在深圳新諾微環(huán)生物科技有限公司做出突破。

 

近期，貴州中澤微環(huán)生物科技有限公司突破性地借助微環(huán)DNA載體，開發(fā)出靶向B淋巴細(xì)胞常見抗原、重定向免疫細(xì)胞的雙抗基因藥—ZM001，用于B淋巴細(xì)胞血液惡性腫瘤的免疫治療。

B淋巴細(xì)胞血液惡性腫瘤包括B細(xì)胞淋巴瘤和急、慢性淋巴細(xì)胞白血病。B細(xì)胞淋巴瘤占非霍奇性淋巴瘤病例的85%，全球范圍內(nèi)每年新發(fā)的B細(xì)胞淋巴瘤病例超30萬，中國新發(fā)病例7至8萬人左右，是一種嚴(yán)重：θ嗣窠】檔牧倚約膊。彩歉鞔笠┢缶合嘌蟹⒌娜鵲慵膊∧勘曛。 

目前，B淋巴細(xì)胞血液惡性腫瘤的免疫療法主要有CD20和CD19兩個靶點的單克隆抗體（單抗）療法、雙抗和CAR-T療法，其中，市場份額最大的是已上市20多年的抗CD20的利妥昔單抗，2019年全球銷售額仍接近70億美元。

與過去藥物不同，借助基因療法的ZM001進入人體后，將人體靶細(xì)胞轉(zhuǎn)化為體內(nèi)“雙抗合成工廠”，從而源源不斷地在體內(nèi)生產(chǎn)治療性雙抗蛋白，免去了體外細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)蛋白的繁瑣過程，同時有效地克服了蛋白藥物半衰期不足的問題。此外，ZM001易于組合成復(fù)方進行治療，這也將為患者提供更加個性化的組合式選擇。

藥物應(yīng)用于臨床，僅靠前期研發(fā)是遠遠不夠的，大規(guī)模生產(chǎn)的基因藥物產(chǎn)業(yè)化則是藥物上市必須解決的問題。
       2018年起，中澤微環(huán)與九游會j9生物 合作，由九游會j9生物 為中澤微環(huán)ZM001微環(huán)DNA藥物提供完整的臨床前IND申報服務(wù)。該項目歷經(jīng)11個月，日前已完成從質(zhì)：銑、小試工藝開發(fā)、到臨床申報樣品GMP放大生產(chǎn)的整套IND服務(wù)，并形成全套中美IND申報的CMC雙語資料，正在進行穩(wěn)定性研究、包材相容性研究和動物實驗。

在此合作中，九游會j9生物 充分利用公司在質(zhì)粒研發(fā)、生產(chǎn)和質(zhì)控方面的技術(shù)，結(jié)合豐富的生產(chǎn)經(jīng)驗，為ZM001項目的順利交付，突破了有別于常規(guī)質(zhì)粒生產(chǎn)的三大技術(shù)難點：
 

√國內(nèi)首次實現(xiàn)微生物在一次性生物反應(yīng)器的大規(guī)模生產(chǎn)

國內(nèi)首次在一次性反應(yīng)器中實現(xiàn)50L高密度發(fā)酵及母環(huán)質(zhì)粒誘導(dǎo)重組，同時確保微環(huán)DNA載體的高產(chǎn)；

√ 全新開發(fā)針對微環(huán)DNA載體的層析和超濾工藝

該工藝能夠高效去除與微環(huán)DNA理化性質(zhì)極為相近的雜質(zhì)（如開環(huán)微環(huán)DNA殘留、宿主DNA殘留、母環(huán)質(zhì)粒殘留等），從而最大限度保證產(chǎn)品純度；

√ 全新開發(fā)針對微環(huán)DNA載體的分析和表征方法

全面保障產(chǎn)品的安全性和有效性。

 

部分純度及活性相關(guān)質(zhì)控結(jié)果如下表所示，產(chǎn)品的質(zhì)量和批次穩(wěn)定性符合中美IND申報的要求：

 

貴州中澤微環(huán)生物科技有限公司由貴州漁陽貿(mào)易有限公司和深圳新諾微環(huán)生物科技有限公司創(chuàng)立，主要進行微環(huán)DNA的新藥研究和產(chǎn)業(yè)化，現(xiàn)階段的研究重點內(nèi)容主要包括：利用優(yōu)化的非病毒基因載體（微環(huán)DNA）和靶向遞送平臺技術(shù)等自主知識產(chǎn)權(quán)，致力于治療B細(xì)胞淋巴瘤的創(chuàng)新型雙特異性抗體基因治療藥物及血液腫瘤治療方面的系列基因藥物的研究、開發(fā)和產(chǎn)業(yè)化發(fā)展。

微環(huán)DNA可用于開發(fā)癌癥、單基因缺陷罕見病、慢性病和傳染病等的治療藥物，作為技術(shù)方的新諾微環(huán)（synomc.com），正積極融資開展抗癌和罕見病基因治療藥物的產(chǎn)業(yè)化，歡迎咨詢與洽談。