九游會j9雙十一?科研不缺席 | Cre鼠項目服務(wù)

時間：2021-11-04 熱度：

隨著研究的不斷深入，現(xiàn)代神經(jīng)科學(xué)需要關(guān)注大量不同種類的神經(jīng)元或膠質(zhì)細(xì)胞，進(jìn)行精細(xì)研究，除了特異性啟動子的應(yīng)用外，還可以借助多種Cre小鼠模型配合DIO病毒策略或flox小鼠策略以實現(xiàn)特異性操作神經(jīng)元的目的。

Cre-LoxP系統(tǒng)

來源于噬菌體P1的Cre/loxP系統(tǒng)主要包括2個重要組成部分：一個是loxP位點(diǎn)，另一個就是可以對loxP位點(diǎn)進(jìn)行識別的Cre酶，使兩個loxP位點(diǎn)間發(fā)生基因重組，實現(xiàn)對目的基因刪除、翻轉(zhuǎn)、易位和序列互換。在神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域，此技術(shù)可以用于對神經(jīng)環(huán)路的特異性標(biāo)記、特異細(xì)胞類型中內(nèi)源基因的功能研究及構(gòu)建小鼠模型等。(更多Cre體系相關(guān)內(nèi)容，可參考【知識分享】一半海水、一半火焰，分子表達(dá)操控中高頻出現(xiàn)的Cre、Flp、Dre等重組酶系統(tǒng)如何工作)

Cre鼠策略

利用基因敲入手段，借助CRISPR/Cas9技術(shù)，將Cre重組酶定點(diǎn)插入到小鼠基因組中，獲得可特異性在某類神經(jīng)元中表達(dá)Cre的工具鼠，從而可以配合AAV-DIO病毒載體，做到精準(zhǔn)操控神經(jīng)元的目的，亦可以和多種Flox鼠搭配使用，研究不同基因的功能。

以Thy1-iCre工具鼠為例構(gòu)建策略

九游會j9Cre鼠項目

Cre鼠配合重組AAV病毒可在特定腦區(qū)實現(xiàn)細(xì)胞特異性標(biāo)記、光遺傳學(xué)和化學(xué)遺傳學(xué)操縱、在體鈣成像記錄，或者組織特異性的基因編輯。

病毒載體介導(dǎo)的Cre/loxP系統(tǒng)

相較于轉(zhuǎn)基因小鼠，借助病毒載體介導(dǎo)的Cre系統(tǒng)實現(xiàn)特異性操作神經(jīng)元或基因的目的，同時可以大大縮短實驗的周期，另外，多種多樣的病毒載體，可以最大限度的滿足各類實驗的需求。各類病毒載體的特點(diǎn)如下：

借助Cre品系的小鼠和Cre依賴表達(dá)的病毒載體結(jié)合使用，可以達(dá)到特異性對某些細(xì)胞的標(biāo)記和操控目的。運(yùn)用神經(jīng)示蹤技術(shù)對大腦特定神經(jīng)環(huán)路的結(jié)構(gòu)和功能進(jìn)行解析時，亦可以借助Cre重組酶系統(tǒng)和AAV血清型（比如rAAV2/9、rAAV2/retro、rAAV2/1）結(jié)合適用，達(dá)到特異性對神經(jīng)環(huán)路標(biāo)記和功能研究的目的。

在實際進(jìn)行實驗課題過程中，病毒載體輔助和Cre小鼠的配合使用即有互補(bǔ)性，又能相互驗證，成為動物體內(nèi)研究尤其是神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域研究中不可或缺的助力。

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