長鏈非編碼RNA(lncRNA)是一類長度大于200個(gè)核苷酸，不具有蛋白編碼能力的線性RNA分子，基因組DNA轉(zhuǎn)錄生成lncRNA后，一些lncRNA在細(xì)胞核內(nèi)發(fā)揮功能，另外一些lncRNA被轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞質(zhì)，在細(xì)胞質(zhì)中l(wèi)ncRNA可以調(diào)控mRNA穩(wěn)定性、翻譯效率和干擾蛋白翻譯后修飾。

LncRNA根據(jù)其相對(duì)位置在調(diào)控靶編碼基因中發(fā)揮重要作用，根據(jù)其在基因組上與編碼基因相對(duì)位置的不同，可以將lncRNA分為以下幾類（見圖1）：1.啟動(dòng)子區(qū)（來自啟動(dòng)子區(qū)域的轉(zhuǎn)錄本）；2.內(nèi)含子間（主要產(chǎn)生于編碼基因的內(nèi)含子區(qū)）；3.雙向（與蛋白質(zhì)編碼基因共享相同的啟動(dòng)子，但轉(zhuǎn)錄方向相反）；4.正義鏈（轉(zhuǎn)錄方向與蛋白質(zhì)編碼基因方向相同，存在于同一編碼基因正義鏈，具有重疊的外顯子）；5.反義鏈（轉(zhuǎn)錄方向與蛋白質(zhì)編碼基因方向相反，存在于反義鏈，至少有一個(gè)外顯子重疊）；6.3’UTR區(qū)（來自3’UTR區(qū)域的轉(zhuǎn)錄本）；7.基因間（來自于兩個(gè)蛋白質(zhì)編碼基因之間的DNA序列）。與mRNA類似，lncRNA也可以存在于細(xì)胞核或細(xì)胞質(zhì)中，但主要位于細(xì)胞核。

圖1 長鏈非編碼RNA分類

來源：Xiaomei Huang et al., Canner Lett. 2018

由于lncRNA的復(fù)雜性和多樣性，不能簡單地根據(jù)其結(jié)構(gòu)或序列來描述其功能，但lncRNA的一個(gè)重要作用是調(diào)節(jié)鄰近蛋白編碼基因的表達(dá)。LncRNA在不同水平上調(diào)節(jié)基因表達(dá)：

表觀遺傳修飾

表觀遺傳修飾是指在細(xì)胞核DNA序列不發(fā)生變化的情況下，基因表達(dá)發(fā)生可逆和可遺傳的變化，這種修飾包括染色質(zhì)重塑、DNA甲基化和組蛋白修飾。

1.組蛋白乙?；航M蛋白乙?；倪^程促進(jìn)了基因表達(dá)、蛋白質(zhì)活性或生理過程。

2.染色質(zhì)修飾復(fù)合物的招募：lncRNA將染色質(zhì)修飾復(fù)合物招募到特定的位點(diǎn)，介導(dǎo)相關(guān)基因的表達(dá)或沉默。

3.DNA甲基化：通過改變?nèi)旧|(zhì)結(jié)構(gòu)、DNA構(gòu)象、DNA穩(wěn)定性以及DNA與蛋白質(zhì)的相互作用來控制基因的表達(dá)。

轉(zhuǎn)錄調(diào)控

4.轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)：LncRNA可抑制靶基因轉(zhuǎn)錄因子活性，抑制其基因表達(dá)。如lncRNA的轉(zhuǎn)錄干擾臨近基因的表達(dá)；lncRNA通過封阻啟動(dòng)子區(qū)域干擾基因表達(dá)；lncRNA與RNA結(jié)合蛋白作用，定位到基因啟動(dòng)子區(qū)調(diào)控基因表達(dá)；lncRNA能調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄因子活性，調(diào)控基因表達(dá)。

轉(zhuǎn)錄后調(diào)控

5.可變剪接：LncRNA可以促進(jìn)pre-mRNA和可變剪接因子的結(jié)合，有助于產(chǎn)生成熟mRNA。

6.競爭性RNA：LncRNA可以作為miR海綿，競爭miRNA，然后解除對(duì)靶基因的抑制。

7.蛋白去磷酸化：LncRNA參與蛋白去磷酸化。

8.抑制蛋白降解：LncRNA與蛋白質(zhì)相互作用并抑制其泛素化降解。
 

圖2 LncRNA在不同水平上調(diào)節(jié)基因表達(dá)

來源：Xiaomei Huang et al., Canner Lett. 2018

LncRNA雖然不能編碼蛋白質(zhì)，但可以向下游傳遞信息，調(diào)控基因表達(dá)，表明lncRNA可能作為基于RNA的信息庫，具有與蛋白質(zhì)組學(xué)競爭的能力，在疾病診斷和靶向治療中甚至比蛋白質(zhì)更加敏感和特異。因此lncRNA的研究越來越廣泛。

1.LncRNA精準(zhǔn)表達(dá)。

2.載體上熒光表達(dá)更亮。

3.改善由于基因引起的不出毒，出毒更穩(wěn)定。

驗(yàn)證結(jié)果：

PCR驗(yàn)證表達(dá)精確：  
 

感染效果圖：

九游會(huì)j9研發(fā)團(tuán)隊(duì)專注于病毒載體及包裝系統(tǒng)進(jìn)行研發(fā)，對(duì)慢病毒主要元件進(jìn)行改進(jìn)和優(yōu)化，并獲得相關(guān)授權(quán)專利。