桿狀病毒——大容量工具載體 | 新品發(fā)布
桿狀病毒是一類(lèi)具有囊膜包裹的雙鏈環(huán)狀DNA病毒，其基因組大小為80-180Kb，廣泛應(yīng)用于昆蟲(chóng)細(xì)胞的重組蛋白生產(chǎn)與哺乳動(dòng)物細(xì)胞的外源基因?qū)?/strong>。體外基因表達(dá)主要包括真核細(xì)胞系統(tǒng)和原核細(xì)胞系統(tǒng)，原核系統(tǒng)主要是大腸桿菌細(xì)胞系統(tǒng)，具有表達(dá)產(chǎn)物穩(wěn)定的特點(diǎn)，但是其表達(dá)基因的分子量受容量限制，且不能對(duì)表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行翻譯后修飾；真核表達(dá)系統(tǒng)主要有酵母細(xì)胞和昆蟲(chóng)細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)，除了具備大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)產(chǎn)物表達(dá)穩(wěn)定的特點(diǎn)外，還具有容量大，對(duì)表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行翻譯后修飾的特點(diǎn)。隨著桿狀病毒研究的進(jìn)展，重組桿狀病毒已被證明可以進(jìn)入各種哺乳動(dòng)物細(xì)胞，并在哺乳動(dòng)物啟動(dòng)子的控制下表達(dá)外源基因，而不需要任何病毒復(fù)制，因此，它們已被用于將基因傳遞到哺乳動(dòng)物細(xì)胞中。
圖1 桿狀病毒感染哺乳動(dòng)物細(xì)胞1
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桿狀病毒蛋白表達(dá)系統(tǒng)是目前較為廣泛的重組蛋白表達(dá)的體系。此外，桿狀病毒作為工具載體將目的基因?qū)?/span>哺乳動(dòng)物細(xì)胞，用于基礎(chǔ)研究，蛋白、疫苗生產(chǎn)，基因治療，病毒生產(chǎn)等。最初關(guān)于桿狀病毒對(duì)哺乳動(dòng)物細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)報(bào)道主要集中在肝源細(xì)胞領(lǐng)域，如肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞2、HepG23等，隨后更多關(guān)于桿狀病毒感染其他類(lèi)型哺乳動(dòng)物的報(bào)道，如HeLa、CHO、Cos-7、293、原代細(xì)胞和多能干細(xì)胞4等。桿狀病毒載體具有裝載容量大、易于使用、克隆能力強(qiáng)、細(xì)胞毒性低、低生物危險(xiǎn)性、成本低、重現(xiàn)性好等特點(diǎn)。桿狀病毒瞬時(shí)轉(zhuǎn)染蛋白表達(dá)，一般2-3天即可開(kāi)始表達(dá)，7天后表達(dá)衰減。桿狀病毒基因組容量大，可以實(shí)現(xiàn)較大目的基因的表達(dá)。
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桿狀病毒優(yōu)勢(shì)
1、桿狀病毒容量大，因此可以插入達(dá)目的基因片段或多個(gè)基因和調(diào)控元件。
2、桿狀病毒不會(huì)在轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)復(fù)制，也不會(huì)將其DNA整合到宿主染色體中，因此緩解了安全性的擔(dān)憂(yōu)。
3、野生桿狀病毒對(duì)哺乳動(dòng)物無(wú)傳染性，使得桿狀病毒在表達(dá)致癌基因或潛在毒性蛋白時(shí)可能有更高的安全性。
4、重組桿狀病毒可以在生物安全1級(jí)環(huán)境中操作，通過(guò)感染其自然宿主昆蟲(chóng)細(xì)胞構(gòu)建并繁殖到高滴度。
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感染經(jīng)驗(yàn)
九游會(huì)j9生物桿狀病毒體外感染經(jīng)驗(yàn)：
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參考文獻(xiàn)：
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