時(shí)間：2018-06-27 熱度：

如果說(shuō)有什么活動(dòng)能讓彼此陌生的一群人一起歡呼，能讓不同國(guó)家、不同種族、不同性別的人共同激動(dòng)，F(xiàn)IFA世界杯一定是當(dāng)仁不讓的第一答案！

四年一度的足球盛宴是全人類的大狂歡，九游會(huì)j9為心愛的球隊(duì)振臂吶喊，為足球癡狂?？駳g時(shí)刻，作為看球標(biāo)配的啤酒怎可缺席！數(shù)據(jù)顯示，本屆世界杯開始后，多地啤酒的銷量同比上升50%以上。

（九游會(huì)j9生物 溫馨提示：比賽有輸贏，生命只一次，適度飲酒，拒絕酒后駕車）！

言歸正傳，適量小酌是有好處的。啤酒可以促進(jìn)血液循環(huán)，使人心情愉悅、保持活力，是夏秋季暑降溫解渴止汗的清涼飲料。但是，過(guò)量酗酒則會(huì)產(chǎn)生大量不良后果，如誘發(fā)II型糖尿病、高血壓、血脂異常（如甘油三酯高等）、痛風(fēng)等多種頑疾，數(shù)據(jù)顯示，酗酒是5%疾病的罪魁禍?zhǔn)譡1]。酒癮一旦養(yǎng)成，則十分難以戒除，目前酒精成癮的：ι踔臉?biāo)海洛蚁柾可卡因[2]。

過(guò)去的研究針對(duì)酒精獎(jiǎng)賞、渴求、復(fù)發(fā)等行為的神經(jīng)環(huán)路以及分子機(jī)制進(jìn)行研究，但是這些研究并未能有效控制酗酒行為，表明過(guò)去針對(duì)酒精獎(jiǎng)賞而構(gòu)建的行為范式可能并不是研究酒精成癮的完美方案。

就九游會(huì)j9的自身經(jīng)歷而言，九游會(huì)j9很多人都喝過(guò)酒，但是產(chǎn)生酒癮的人非常少。然而，在模式動(dòng)物中，幾乎所有動(dòng)物都能學(xué)會(huì)主動(dòng)獲取成癮藥物，包括酒精，這是一個(gè)巨大的矛盾，這意味著這種成因模型在研究酒精成癮中是不夠的[3]。因此，找到從主動(dòng)尋找成癮藥物（包括酒精）到成癮的轉(zhuǎn)換因素成為此類模型構(gòu)建的關(guān)鍵。

如何構(gòu)建呢？

九游會(huì)j9都有一種經(jīng)驗(yàn)，即成癮的患者在獲取成癮因素（如酒精）的時(shí)候是不擇手段的，是會(huì)忽略所有美好的其他事物的癲狂狀態(tài)，科學(xué)家正是利用這個(gè)現(xiàn)象構(gòu)建新的模型。

2018年6月22日，Science雜志刊登了瑞典Link?ping大學(xué)M. Heilig研究組的最新工作[4]，他們建立了一種新的行為學(xué)范式，讓大鼠在酒精與甜水之間做出選擇，篩選出了一些“酒鬼”鼠模型，并發(fā)現(xiàn)“酒鬼”鼠中央杏仁核（CeA）中γ-氨基丁酸轉(zhuǎn)運(yùn)體-3（GAT-3）表達(dá)量顯著降低，敲除正常大鼠CeA中GAT-3會(huì)誘發(fā)其酒癮。

M. Heilig教授

結(jié)果

1.“酒鬼“鼠模型的建立

對(duì)甜味的偏好是人類與其它動(dòng)物高度保守的天性[5]，作者利用這個(gè)天性，就大鼠對(duì)酒精或甜味的選擇性展開研究。

首先作者使用酒精自給藥（self-administer）行為學(xué)范式訓(xùn)練大鼠10個(gè)月后進(jìn)行糖水/酒精偏好實(shí)驗(yàn)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，盡管這些大鼠從未接觸過(guò)糖精，但多數(shù)大鼠依然會(huì)偏好0.04%糖精，而不是20%酒精，將糖精濃度增至0.2%會(huì)加大此偏好性（圖1A-C）。有趣的是，仍有少量大鼠選擇酒精而不是甜水，作者共用620只大鼠進(jìn)行此行為學(xué)實(shí)驗(yàn)，其中95只選擇酒精，占比15.3%（圖1D），作者稱之為“酒鬼”鼠(Alcohol-preferring, AP)，偏好甜水的大鼠稱為糖精偏好鼠（Saccharin-preferring, SP）。

酗酒成癮的人有三個(gè)特點(diǎn)：1.喜歡美酒超越其他美食即飲料；2.飲酒動(dòng)力極強(qiáng)，為飲一瓶不惜翻山越嶺；3.不計(jì)后果，明知有害也要狂飲，不醉不休。第一點(diǎn)，作者已經(jīng)驗(yàn)證，后兩點(diǎn)，他們發(fā)現(xiàn)AP鼠對(duì)酒精展現(xiàn)出極強(qiáng)動(dòng)力，而SP鼠不會(huì)；如果在酒精中摻入苦味劑奎寧或者在飲酒時(shí)電擊大鼠，SP鼠會(huì)少飲很多，而AP依然開懷暢飲（圖1E-G）。表明AP鼠具有酗酒成癮人類的全部特點(diǎn)。

圖1 “酒鬼”鼠偏好飲酒超越甜水

2.“酒鬼”鼠CeA腦區(qū)中GAT-3表達(dá)下調(diào)

在篩選出AP鼠之后，作者使用Nanostring nCounter陣列方法，分析比較AP鼠與SP鼠大腦伏隔核、紋狀體、前額葉皮層、海馬和杏仁核中310個(gè)成癮相關(guān)基因的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)杏仁核中兩種鼠基因表達(dá)差異最大，其中多種γ-氨基丁酸（GABA）重吸收相關(guān)基因表達(dá)下調(diào)（圖2A-B）。通過(guò)qPCR進(jìn)一步檢測(cè)，他們發(fā)現(xiàn)CeA中GAT-3、GAT-1、BGT-1等多種GABA轉(zhuǎn)運(yùn)體基因以及其他GABA重吸收相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄水平均顯著下降（圖2C-D）。

圖2“酒鬼”鼠CeA腦區(qū)中多種GABA轉(zhuǎn)運(yùn)體表達(dá)下調(diào)

3.“酒鬼”鼠CeA腦區(qū)神經(jīng)元活動(dòng)被抑制

上文指出，AP鼠GAT-3等多種GABA轉(zhuǎn)運(yùn)體表達(dá)下調(diào)，而GABA轉(zhuǎn)運(yùn)體負(fù)責(zé)將抑制性神經(jīng)遞質(zhì)GABA重吸收，那么AP鼠CeA中GABA作用時(shí)間會(huì)被延長(zhǎng)，作者就此推論展開研究。
他們使用膜片鉗電生理技術(shù)記錄CeA神經(jīng)元，發(fā)現(xiàn)在AP鼠中，相同電刺激會(huì)誘發(fā)更大的電位，表明突觸傳遞水平的提升，而Paired-pulse ratio（PPR）不變，表明突觸前釋放能力不變。此外，加入GABAA受體抑制劑bicuculine會(huì)顯著增加AP鼠刺激后電位的幅度，表明AP鼠CeA中GABA信號(hào)作用較強(qiáng)（圖3A-C）。

為驗(yàn)證此現(xiàn)象由GAT-3表達(dá)下調(diào)引起，作者在正常大鼠CeA中注射AAV-Slc6a11-shRNA來(lái)基因敲低GAT-3，結(jié)果發(fā)現(xiàn)操作后，CeA神經(jīng)元電生理性質(zhì)與AP鼠完全相同（圖3D-F）。

圖3 “酒鬼”鼠CeA腦區(qū)神經(jīng)元被強(qiáng)直性抑制

4.敲低SP鼠CeA中GAT-3基因誘發(fā)酒精偏好行為

進(jìn)一步，作者在SP鼠的CeA中注射AAV-Slc6a11-shRNA來(lái)敲低GAT-3，發(fā)現(xiàn)CeA中GAT-3轉(zhuǎn)錄水平和表達(dá)水平均顯著下降（圖4A-C），同時(shí)會(huì)顯著增加SP鼠對(duì)酒精的偏好性（圖4D-E）。

圖4敲低SP鼠CeA中GAT-3誘發(fā)酒精偏好行為

5.酒精成癮患者CeA中GAT-3轉(zhuǎn)錄水平顯著下降

最后，借助人類腦庫(kù)，作者在人類酒精成癮患者死后的大腦組織樣本中進(jìn)行RNA測(cè)序，發(fā)現(xiàn)只有CeA中GAT-3基因轉(zhuǎn)錄水平顯著下降，而其它腦區(qū)中無(wú)差異（圖5），進(jìn)一步印證了GAT-3基因與酒精成癮的關(guān)系。

圖5人類酒精成癮患者CeA中GAT-3轉(zhuǎn)錄水平顯著下降

總結(jié)

酗酒問(wèn)題已經(jīng)成為一個(gè)嚴(yán)重的社會(huì)問(wèn)題，酒癮會(huì)誘發(fā)多種疾。湮：ι踔糧哂詼嘀侄酒。過(guò)去的研究通過(guò)自給藥行為學(xué)范式研究酒精成癮行為，但存在大量不足。本篇文章開發(fā)了新的行為學(xué)范式，篩選出了酒精成癮大鼠，它們對(duì)酒精的偏好性極強(qiáng)。此外，他們還找到了誘發(fā)此現(xiàn)象的分子機(jī)制——CeA中 GAT-3表達(dá)量下降，基因敲低正常大鼠中GAT-3基因可誘發(fā)類似酒癮鼠的行為。

這項(xiàng)發(fā)現(xiàn)提示GAT-3可能是臨床治療酒精成癮的一個(gè)重要靶點(diǎn)，借助基于AAV病毒載體的基因治療手段，或許九游會(huì)j9可以快速治愈酒精成癮，提升人類健康水平！

九游會(huì)j9生物 一直關(guān)注神經(jīng)、代謝、腫瘤領(lǐng)域的重大研究進(jìn)展，為各種生理、病理研究提供最新工具和研究方案，助力臨床轉(zhuǎn)化和基因治療！

參考文獻(xiàn)
1.Whiteford, H.A., et al., Global burden of disease attributable to mental and substance use disorders: findings from the Global Burden of Disease Study 2010. Lancet, 2013. 382(9904): p. 1575-86.
2. Nutt, D.J., et al., Drug harms in the UK: a multicriteria decision analysis. Lancet, 2010. 376(9752): p. 1558-65.
3.Ahmed, S.H., Validation crisis in animal models of drug addiction: beyond non-disordered drug use toward drug addiction. Neurosci Biobehav Rev, 2010. 35(2): p. 172-84.
4.Augier, E., et al., A molecular mechanism for choosing alcohol over an alternative reward. Science, 2018. 360(6395): p. 1321-1326.
5.Berridge, K.C. and M.L. Kringelbach, Affective neuroscience of pleasure: reward in humans and animals. Psychopharmacology (Berl), 2008. 199(3): p. 457-80.。