慢病毒系列|體內(nèi)“追蹤器”
在腫瘤研究中,研究者通常需要在體內(nèi)開展腫瘤發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移的示蹤實(shí)驗(yàn)。對(duì)于此類實(shí)驗(yàn),人們可借助攜帶螢光素酶(luciferase)基因、熒光蛋白基因的慢病毒感染腫瘤細(xì)胞系,構(gòu)建可表達(dá)螢光素酶、熒光蛋白的穩(wěn)定細(xì)胞株,并借助細(xì)胞的體內(nèi)成瘤動(dòng)物模型構(gòu)建,完成腫瘤細(xì)胞的示蹤。
基于此,九游會(huì)j9生物的研發(fā)團(tuán)隊(duì)不斷改進(jìn)三標(biāo)慢病毒,現(xiàn)擁有3.0版本的新型三標(biāo)慢病毒攜帶熒光蛋白(熒光更強(qiáng))、螢光素酶(表達(dá)量更高)、抗性基因用于活體成像、體內(nèi)示蹤腫瘤的發(fā)生及轉(zhuǎn)移。
三標(biāo)慢病毒的迭代升級(jí)
熒光結(jié)果
攜帶螢光素酶基因的腫瘤細(xì)胞系接種到小鼠原位器官或者組織進(jìn)行荷瘤,借助螢光素酶與螢光素酶底物的反應(yīng)原理,可通過活體成像技術(shù)觀察腫瘤大小及轉(zhuǎn)移等情況。
腫瘤的體內(nèi)發(fā)展
發(fā)表期刊:Theranostics
IF:11.6
客戶及單位:齊魯醫(yī)院李新鋼教授&王劍教授
本文探索NONO對(duì)腦膠質(zhì)瘤(GBM)進(jìn)展的影響。通過慢病毒同時(shí)攜帶干擾NONO序列以及Luciferase編碼序列感染GBM細(xì)胞(P3患者來源、U251為細(xì)胞系)構(gòu)建穩(wěn)定細(xì)胞系,小鼠麻醉后經(jīng)額葉注射表達(dá)Luciferase的穩(wěn)定細(xì)胞系(5 × 105 cells/10 μL PBS)。對(duì)原位移植模型進(jìn)行生物發(fā)光體內(nèi)成像檢測(cè)。結(jié)果顯示:原位移植瘤生長(zhǎng)受抑制,荷瘤小鼠的總生存期延長(zhǎng),NONO的缺失進(jìn)一步抑制了GBM在體內(nèi)的發(fā)展。
敲低NONO可抑制GBM細(xì)胞的增殖和侵襲(PMID:35910786)
細(xì)胞的體內(nèi)遷移
發(fā)表期刊:Nat Commun
IF:17.694
客戶及單位:中山大學(xué)第八附屬醫(yī)院沈慧勇教授
本篇文章探索TNF-α對(duì)強(qiáng)直性脊柱炎(AS)患者的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)的作用。通過慢病毒攜帶luciferase感染MSC,將5 × 105 MSC-luc移植到裸鼠背側(cè)皮下,并在MSC周圍注射TNF-α,然后進(jìn)行生物發(fā)光體內(nèi)成像檢測(cè)。結(jié)果顯示:相較于HC-MSC(健康樣本),TNF-α可促進(jìn)AS-MSC在體內(nèi)的定向遷移。
TNF-α可促進(jìn)AS-MSC在體內(nèi)的定向遷移(PMID:34508078)
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