九游會j9生物科研服務(wù)平臺可為基因功能研究者提供前沿、全面、嚴謹?shù)妮d體設(shè)計和載體構(gòu)建服務(wù)，內(nèi)容涵蓋普通真核表達載體、病毒載體等。
病毒載體構(gòu)建服務(wù)包含慢病毒、腺相關(guān)病毒、腺病毒和逆轉(zhuǎn)錄病毒載體等，構(gòu)建內(nèi)容包括基因過表達載體構(gòu)建、基因定點突變表達載體構(gòu)建、用于基因沉默的shRNA設(shè)計與構(gòu)建、microRNA表達與封閉載體設(shè)計與構(gòu)建、螢光素酶報告基因載體構(gòu)建（UTR、啟動子及其它功能序列）以及Cre-LoxP系統(tǒng)和CRISPR/Cas9基因編輯工具載體設(shè)計與構(gòu)建等，力求一站式解決基因功能研究中的基因上調(diào)和基因下調(diào)需求。
質(zhì)粒優(yōu)勢：
?、俦磉_時間快，導入細胞后約24小時可觀察到目的基因表達；
、詮菇際跫虻，成本低。
、劬龐位醞9的過表達載體庫豐富，并且過表達的標記豐富
熒光標記：GFP、mCherry、CFP、BFP、EYFP、mNeonGreen、tdTomato、 mScarlet…
標簽標記: FLAG、 HA 、Myc、His tag…
抗性標記：Puro、Neo、Hygro、BSD…
局限性：
、僮臼約輛哂邢赴拘裕褂煤笥跋煜赴刺
、詿蟛糠窒赴夏炎荊鋝壞交蠆僮髂康模
③質(zhì)粒不整合到細胞基因組，只能進行短時間的瞬時表達，無法進行觀察周期較長的實驗。
由于單純質(zhì)粒存在一定的局限性，根據(jù)實驗需要需包成病毒進一步滿足不同實驗的需求。
不同表達載體的區(qū)別
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表達系統(tǒng) |
真核表達載體 |
慢病毒載體 |
重組腺相關(guān)病毒載體 |
重組腺病毒載體 |
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載體基因特性 |
雙鏈DNA質(zhì)粒 |
RNA逆轉(zhuǎn)錄病毒 |
單鏈DNA病毒 |
雙鏈DNA病毒 |
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外源基因表達時間 |
24h開始表達，持續(xù)3-7天 |
2-4天開始表達，長時間穩(wěn)定表達 |
7-14天開始表達 |
1-2天開始表達 |
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插入片段大小 |
8kb左右 |
4kb左右 |
2.8kb左右 |
6kb左右 |
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穩(wěn)定細胞株篩選 |
難操作 |
可以 |
不可以 |
不可以，瞬時表達 |
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細胞實驗 |
細胞系，部分轉(zhuǎn)染效率低 |
首。閆，感染效率高 |
不適合 |
廣譜，感染效率高 |
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動物實驗 |
不適合 |
適合，根據(jù)觀察時間和注射部位 |
首。莨鄄焓奔浜妥⑸洳課 |
免疫原性高，慎選 |
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滴度范圍 |
無 |
108~109TU/ml |
1012-1013vg/ml |
1010-1011pfu/ml |
