整體課題外包服務(wù)
一、整體課題（嚴(yán)謹(jǐn)真實(shí)、結(jié)果可靠）
1. 高通量基因篩。河酶咄坎廡、基因芯片和 CRISPR/Cas9 文庫進(jìn)行關(guān)鍵基因篩選。
真核轉(zhuǎn)錄組測序、外顯子組測序、基因表達(dá)譜芯片、miRNA 測序/芯片
m6A 甲基化測序、lncRNA 測序/芯片、單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組測序、iTRAQ 蛋白質(zhì)組定量
Nat Commun. 2016 Apr 6;7:11215.
2. 基因調(diào)控：用病毒或質(zhì)粒載體介導(dǎo)基因過表達(dá)、敲除或干擾，可以實(shí)現(xiàn)對(duì)基因表達(dá)的上調(diào)或下調(diào)。
過表達(dá)質(zhì)粒、干擾質(zhì)粒、CRISPR/Cas9 質(zhì)粒
腺相關(guān)病毒（AAV）、慢病毒（LV）、腺病毒（ADV）、逆轉(zhuǎn)錄病毒（RV）
3. 細(xì)胞水平驗(yàn)證：在細(xì)胞水平驗(yàn)證基因的功能，包括細(xì)胞增殖、細(xì)胞遷移與侵襲、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期等。
J Hepatol. 2018 Jun;68(6):1214-1227.
4. 動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)：通過構(gòu)建動(dòng)物模型檢測基因水平變化后引起的指標(biāo)變化，包括皮下成瘤、原位成瘤、大小等。
J Hepatol. 2018 Jun;68(6):1214-1227.
5. 作用機(jī)制研究：進(jìn)一步挖掘出與關(guān)鍵基因相關(guān)的信號(hào)通路或其它基因，包括雙螢光素酶檢測、RNA pull-down、BioID、CO-IP 等。
J Hepatol. 2018 Jun;68(6):1214-1227.
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二、神經(jīng)整體課題（團(tuán)隊(duì)專業(yè)、服務(wù)完善）
1. 疾病模型構(gòu)建：專業(yè)提供慢性痛、腦卒中、抑郁、神經(jīng)退行性疾病、癲癇等神經(jīng)系統(tǒng)動(dòng)物疾病模型的構(gòu)建。
Cichon J et al.,Bio Protoc.2018；Proc Natl Acad Sci U S A. 2017 Jul 11;114(28):E5673-E5682.
2. 環(huán)路示蹤：借助病毒載體的示蹤技術(shù)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)全腦、核團(tuán)、環(huán)路、細(xì)胞、單細(xì)胞及亞細(xì)胞器的標(biāo)記，從復(fù)雜的神經(jīng)環(huán)路到高分辨率的單神經(jīng)元形態(tài)，建立完善的示蹤體系。
Cell Stem Cell. 2020 Mar 5;26(3):331-345.e6.
3. 元件操控：通過病毒載體和腦定位注射技術(shù)可完成基因過表達(dá)、基因沉默、光遺傳學(xué)、化學(xué)遺傳學(xué)的精準(zhǔn)特異性操控。
Science. 2018 Oct 26;362(6413):429-434.
4. 表型篩選及變化：從分子到細(xì)胞再到行為的一站式服務(wù)，包括 WB、qPCR、電生理、病理、免疫組化、行為學(xué)實(shí)驗(yàn)。
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三、m6A 甲基化課題（思路設(shè)計(jì)、服務(wù)完善）
1. 預(yù)實(shí)驗(yàn)：找到與 RNA 甲基化相關(guān)的酶是否有差異表達(dá)或檢測整體 m6A 水平，用 qPCR、WB、組織芯片、質(zhì)譜檢測等，再進(jìn)行甲基化酶敲低、敲除和過表達(dá)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。
Song H et al. Autophagy. 2019；Chen M. et al. (2018) Hepatology, 67(6): 2254
2. 通過 m6A-seq 測序，可以知道哪些基因在 RNA 甲基化修飾上有差異,再結(jié)合轉(zhuǎn)錄組測序，發(fā)現(xiàn)差異基因的表達(dá)水平變化。
Chen M. et al. (2018) Hepatology, 67(6): 2254
3. 獲得 RNA 甲基化修飾的目的基因后，再對(duì) m6A 甲基化進(jìn)行修復(fù)，觀察位點(diǎn)修復(fù)正：蠖韻赴硇禿托∈蟪閃黽按笮〉撓跋。
Huang H et al. Nat Cell Biol. 2018
4. 進(jìn)一步挖掘甲基化酶通過哪些通路對(duì)目的基因進(jìn)行調(diào)控或蛋白互作技術(shù)挖掘蛋白，包括蛋白與 DNA 或 RNA 互作、蛋白與蛋白互作、靶基因驗(yàn)證等。
Chen M. et al. (2018) Hepatology, 67(6): 2254
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四、外泌體研究課題（經(jīng)驗(yàn)豐富、質(zhì)量可靠）
1. 外泌體分離：差速超速離心法可以獲得高質(zhì)量、高純度的外泌體，因此被認(rèn)為是分離方法中的「金標(biāo)準(zhǔn)」，也是高分文章中常選的分離方法。
2. 外泌體鑒定：常用的鑒定方法包括透射電鏡（TEM）、納米粒徑跟蹤分析（NTA）、Western Blot（WB）標(biāo)志物檢測等。
ACS Nano. 2019 Feb 26;13(2):2450-2462.
3. 高通量分析：外泌體內(nèi)含有與細(xì)胞來源相關(guān)的核酸和蛋白質(zhì)，可以傳遞 mRNA、miRNA、lncRNA、circRNA、蛋白質(zhì)等進(jìn)入受體細(xì)胞，參與細(xì)胞間通訊。
Cell Commun Signal. 2019 Aug 16;17(1):96.
4. 外泌體示蹤：常用親脂性染料對(duì)外泌體進(jìn)行標(biāo)記，主要包括兩類，一是 PKH67（綠色）和 PKH26（紅色），二是 DiO（綠色）、DiI（橙色）和 DiR（深紅）。
Oncol Rep. 2012 Nov;28(5):1551-8；2019 Oct 29;19(1):1015.
5. 體內(nèi)外功能研究：將標(biāo)記的外泌體與受體細(xì)胞共培養(yǎng)，觀察細(xì)胞功能變化，再將外泌體注射入動(dòng)物模型中，觀察成瘤大。⒓觳庀喙刂副。
Nat Commun. 2018 Jan 15;9(1):191.
